Procurando uma calculadora de temperatura de anelamento que utiliza a equação de Wallace et al para calcular NEB TM online? Então você chegou no lugar certo!
투산 온도 (Tm)는 프라이머가 DNA의 상보적인 가닥에 결합하여 (수소 결합 다리를 형성하여) 연결하거나 "연결"하는 온도입니다. 적절한 연결 온도 선택은 PCR 반응에서 정확하고 특이적인 결과를 얻기 위해 중요합니다.
여러 PCR 단리온 온도를 계산하기 위한 방정식들이 있습니다. 가장 흔히 사용되는 방정식은 Wallace 등의 방정식입니다. 이 방정식은 프라이머 시퀀스와 프라이머 농도뿐만 아니라 프라이머 시퀀스의 GC 염기쌍 수도 고려합니다. Tm을 계산하는 공식은 다음과 같습니다:
Tm = 64.9 + 41*(G + C - 16.4)/(A + T + G + C - 16.4 - 2*P) - 500/(A + T + G + C + 0.41*P)
어디에서요?
Tm = 안넬링 온도(도) A, T, G, C = 프라이머 시퀀스 내 아데닌, 티민, 구아닌, 시토신 염기 수 P = 프라이머 시퀀스 내 GC 염기 쌍의 수
Wallace 등의 방정식은 Tm을 계산하는 여러 방정식 중 하나일 뿐이지만, 그 정확성과 사용 편의성으로 널리 사용됩니다.
Sumário
안타깝게도 이해할 수 없는 문구입니다.
A calculadora usa a equação de Wallace et al. para calcular a Tm com base nas sequências dos iniciadores e na concentração dos iniciadores.
저희 NEB TM 계산기에 대해
A calculadora foi projetada para uso com produtos de PCR NEB. O primeiro passo é selecionar o produto de PCR NEB que você planeja usar na reação de PCR. Isso ajudará a determinar as condições de reação apropriadas e a fórmula correta para calcular a Tm.
Para usar, insira as sequências dos iniciadores na calculadora. Certifique-se de digitar as sequências na ordem correta - o primeiro iniciador na primeira caixa e o segundo iniciador na segunda caixa. A calculadora permite até 3 bases ambíguas (representadas pelos códigos "N", "R", "Y", etc.) nas sequências dos iniciadores.
Após inserir as informações necessárias, clique no botão "Calcular Tm". A calculadora usará a equação de Wallace et al. para calcular a Tm com base nas sequências dos iniciadores e na concentração dos iniciadores.
A calculadora exibirá a Tm calculada em graus Celsius na caixa de texto abaixo do botão "Calcular Tm". Certifique-se de que a Tm calculada esteja dentro da faixa de temperatura adequada para o produto de PCR NEB que você está usando.
Outras formas de Calcular Temperatura de Anelmento
Além da equação de Wallace et al., existem outras equações que podem ser usadas para calcular a temperatura de anelamento de PCR com base nas sequências dos iniciadores. Aqui estão algumas outras equações comuns:
브레스라우어 등의 공식
A fórmula de Breslauer et al. é uma das equações mais antigas e comuns para calcular a temperatura de anelamento de PCR. A equação é dada por:
Tm = 81.5 + 0.41*(G + C) - 675/N - P + S
어디에서요?
Tm = Temperatura de anelamento em graus Celsius G, C = Número de nucleotídeos de guaninae citosina, respectivamente, na sequência dos iniciadores N = Número total denucleotídeos na sequência dos iniciadores P = Número de pares de base na sequência dosiniciadores S = Concentração de sal (Na+) em mol/L
Essa equação é relativamente simples, mas pode não ser tão precisa quanto outras equações mais recentes.
Fórmula de SantaLucia et al.
SantaLucia et al.의 공식은 PCR 단리 온도를 계산하기 위한 보다 최신이고 정확한 방정식이다. 이 방정식은 다음과 같다:
Tm = 100.5 + 41*(G - C/2)/(A + T + G + C) - 820/dH - 16.6*log10(S/1000)
어디에서요?
풀어내는 온도 (°C) G, C = 프라이머 서열에서 구아닌과 시토신의 뉴클레오타이드 숫자, 각각 A, T = 프라이머 서열에서 아데닌과 티민의 뉴클레오타이드 숫자, 각각 dH = 프라이머의 열파괴 엔탈피 (cal/mol) S = 염화나트륨 (Na+) 농도 (mol/L)
이 방정식은 시작 물질의 열역학적 변성 엔탈피를 고려하며, 실험적으로 측정할 수 있는데다가 PCR 반응에서 소금 농도도 고려합니다.
